模基生物標準型金牌基質膠是從富含胞外基質蛋白的小鼠腫瘤中提取出的天然基底膜基質。主要依次為層粘連蛋白(Laminin)、IV型膠原蛋白(Col-IV)、巢蛋白(Entactin)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(Heparan sulphate proteoglycans)及多種細胞因子,如類胰島素生長因子(IGF-1)、轉化生長因子β(TGF-β)、血管內皮生長因子(VEGF)、表皮生長因子(EGF)、成纖維細胞生長因子(bFGF)等。產品溶解于高糖含酚紅DMEM中,且非定制產品均添加了50μg/mL慶大霉素。
細胞增殖或分化相關的二維或三維培養,以及細胞形態的研究,相關應用主要有:細胞侵襲、血管生成和類器官培養等,模基生物推薦您在細胞遷移和侵襲、血管生成測定時選用標準型金牌基質膠。
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產品名稱 |
產品貨號 |
產品規格 |
儲存/運輸溫度 |
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標準型金牌基質膠 |
082704 |
10mL |
≤-20°C |
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標準型金牌基質膠 |
0827045 |
5mL |
≤-20°C |
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標準型金牌基質膠 |
082704T |
1mL |
≤-20°C |
來源:小鼠腫瘤
外觀:①顏色:產品表現為黃色-粉紅色; ②形態:4℃融解后,呈液態
濃度:蛋白濃度范圍在8~12mg/mL之間
內毒素:≤ 4.5EU/ mL
凝膠時間:室溫條件下5-30min凝膠,37°C時成膠速度加快
? 根據GB 14922.2-2011檢測小鼠種群中的病毒、病原菌寄生蟲及細菌結果為陰性。
? 直接接種法檢測產品中是否含真菌、細菌,結果為陰性。
? 對包括LDEV在內的多種病原體進行廣泛的PCR檢測,確保對生產過程中使用的原材料進行嚴格控制。
? 使用PCR技術擴增產品中支原體序列,結果為陰性。
? 使用BCA方法測定蛋白濃度。
? 使用凝膠限度檢查法檢測產品內毒素水平。
? 產品與培養基1:2比例釋后,置于37℃凝膠30分鐘,再加入培養基,產品能在37℃環境中保持這種形態5天。
? 將產品釋至 70%含量,在細胞培養板中滴加50μL,37℃條件下凝膠30分鐘,可以形成穩定的凝膠,加入培養基后,在37℃培養箱中能夠保持這種形態15天。
? 每批次產品都能夠進行腫瘤細胞侵襲實驗和體外血管形成測試。
? 產品在≤-20℃時是穩定的,分裝使用產品以盡可能減少產品的凍融次數。
? 請不要儲存在無霜冰箱中,長期保存時請務必保持產品的凍存狀態。
? 產品首次解凍時,請將西林瓶包埋在碎冰中,并放置在4℃冰箱中待其融解。
? 所有接觸產品的耗材,請提前降溫。
? 請您在使用過程中不要過長時間地用手握住裝有本產品的容具,防止體溫使產品凝膠;若在較短時間內造成產品較為厚重粘稠,您可以將本產品重新置于 0℃ - 4℃ 的環境內1-2 h使其恢復流動性,不影響使用。
? 實驗操作人員嚴格區分實驗操作臺、清潔區和污染區,確保插取吸頭、加樣、丟棄吸頭的動作呈單向流動。
? 產品在每次由冷凍狀態變為融解狀態時,請適當搖晃或使用移液器吹吸,確保體系內部蛋白分布均。
使用方法
模基生物標準型金牌基質膠主要有四種使用方式,我們將為您提供這四種使用方式的的般操作程序,您可以基于您的實驗目的選擇合適的使用方式。
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方式 |
方法 |
適用 |
主要應用 |
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薄層凝膠 |
1. 產品解凍后,適當混,或根據實驗求使用預冷的培養基釋,建議濃度不低于1mg/mL; 2. 向細胞培養板表面加入50μL/cm2基質膠,平鋪均,注意避免產生氣泡; 3.將培養板放置在 37 ℃,等待30 min形成凝膠即可使用,必要時,吸去上清。 |
細胞在薄層基質凝膠頂部擴增 |
?細胞遷移和侵襲 ?原代細胞擴增 |
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薄層包被 |
1. 產品解凍后,適當混,根據實驗求使用預冷的培養基釋,建議濃度不低于0.1mg/mL; 2. 吸取適量體積釋液移液,完全覆蓋細胞培養板表面,搖,建議包被量為0.01-0.02mg/cm2; 3.將培養板放置在 37 ℃,孵育至少1h,吸去上清即可使用。 |
細胞附著在薄層基底膜表面擴增 |
?原代細胞擴增 |
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厚層凝膠 |
1. 產品解凍后,適當混,或根據實驗求使用預冷的培養基釋,建議基質膠占比 > 67%; 2. 向細胞培養板表面加入150-200μL/cm2基質膠,平鋪均,注意避免產生氣泡; 3.將培養板放置在 37 ℃,等待30 min形成凝膠即可使用。 |
細胞在厚層基質凝膠上 形成三維結構 |
?體外血管生成 ?主動脈環 |
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凝膠包埋 |
1. 產品提前解凍備用; 2. 準備所的細胞,用基質膠重懸,建議基質膠占比>70%; 3. 向細胞培養板表面加入15-20μL/cm2,注意避免產生氣泡; 4.將培養板放置在 37 ℃,30 min形成包裹細胞的凝膠,5.向培養板內添加合適的培養基。 |
細胞在基質膠內擴增、發育 |
?類器官培養 ?腫瘤球狀體侵襲 |
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